• laboratuvar-217043_1280

Hücre enkazını giderme yöntemi

Hücre süspansiyonunun mekanik parçalanmasından sonra birçok hücre parçası vardır.Bu parçalar nasıl kaldırılır?Çeşitli yaklaşımlara bir göz atalım:

1. Seyreltme yöntemini kullanın.Hücreler seyreltildiğinde çoğalabilirler, sayıları giderek artacak ve buna bağlı olarak hücre kalıntıları da azalacaktır.
2. Doğal yerleşim de vardır.Hücreler çoğu parçadan daha hızlı yerleşir: : Hücre süspansiyonunu hücreye taşıyın.Santrifüj tüpüHücrelerin çoğu battığında üstteki çözelti emilebilir ve daha sonra hücreleri askıya almak için kültür çözeltisine eklenebilir.Bu yöntem defalarca kullanılabilirken, her seferinde gereksinimlerinizi karşılayıp karşılamadığını mikroskop altında gözlemleyebilirsiniz.
3. Düşük hızlı santrifüjdöküntüleri kaldırabilir, genellikle 700g,5 dakika
4. Santrifüj yaparken, hücre sayısının yeterli olması koşuluyla, santrifüjleme süresini 3 dakika, 1000 rpm yerine 5 dakika, 1000 rpm gibi azaltın ve süpernatantı çıkarın, çünkü nekroz ve döküntüler genellikle süpernatan içindedir!Bu işlemin kuluçka öncesi yıkama işlemi sırasında yalnızca bir kez yapılması gerekir!

Hücre kalıntılarını gidermenin birçok yolu olmasına rağmen, santrifüjlemenin en etkili yöntemlerden biri olduğunu göreceksiniz.

450

Bitki dokuları ve hücreleri selüloz, hemiselüloz ve pektinden oluşan hücre duvarlarına sahip olduğundan, amaca ulaşmak için genellikle kuvars kumu veya cam tozunun uygun ekstraksiyon çözeltisiyle öğütülmesi veya selülazla işlenmesi gerekir.Bakteriyel hücre parçalanması daha zordur, çünkü bakteri hücre duvarı iskeletinin tamamı aslında çok sağlam, peptidoglikan kistik makromoleküllerin kovalent bir bağıdır.Bakteriyel hücre duvarlarını kırmanın yaygın yöntemleri arasında ultrasonik kırma, kum öğütme, yüksek basınçlı ekstrüzyon veya lizozim tedavisi yer alır.Doku ve hücreler parçalandıktan sonra istenilen proteinin ekstraksiyonu için uygun tampon seçilir.Hücre parçaları gibi çözünmeyen materyaller uzaklaştırılır.santrifüjveya filtreleme.

lütfen Whatsapp ve Wechat ile iletişime geçin: +86 180 8048 1709


Gönderim zamanı: Temmuz-24-2023