Kültür yaptığımız hücreler bir kez

hücre fabrikasıkontamine olduğundan çoğunun işlenmesi zordur.Kontamine olmuş hücreler değerliyse ve tekrar elde edilmesi zorsa, bunların uzaklaştırılması için aşağıdaki yöntemler kullanılabilir.

1. Antibiyotik kullanın

Antibiyotikler bakterileri öldürmede daha etkilidir.hücre fabrikaları.Kombinasyon ilaçları tek başına ilaç tedavisine göre daha etkilidir.Koruyucu ilaç, enfeksiyon sonrası ilaç tedavisine göre daha etkilidir.Önleyici ilaç genellikle çift antibiyotik kullanır (penisilin 100u/mL artı streptomisin 100μg/mL).Kirlenmeden sonra temizleme yönteminin normal miktardan 5 ila 10 kat daha fazla olması gerekir.İlaç ilave edildikten sonra 24 ila 48 saat süreyle kullanılmalı ve daha sonra normal rutine geçilmelidir.Kültür sıvısı.Bu yöntem kirlenmenin erken aşamalarında etkili olabilir.Kullanılan antibiyotikler arasında penisilin ve streptomisine ek olarak gentamisin, kanamisin, polimiksin, tetrasiklin, nistatin vb. de yer alabilir. Yaygın olarak kullanılanlar 400 ila 800 μg/mL kanamisin veya 200 μg/mL tetrasiklindir.Ortam her 2 ila 3 günde bir değiştirilir ve tedavi için 1 ila 2 nesile aktarılır.Son yıllarda 4-floro, 2-hidroksikinolin (Siprofloksasin, Cip), Pleu-romutilin türevi (Pleu-romutilin türevi, BM-Cyclin2: BM-1 ve tetrasiklin türevi (BM-2)) Antibiyotiklerin kullanıldığı rapor edilmiştir. Tek başına veya kombinasyon halinde kullanıldığında mikoplazmayı öldürmede etkilidir.Bu üç antibiyotiğin tümü PBS içerisinde 250X konsantre çözeltiler halinde hazırlanır ve daha sonra kullanılmak üzere -20°C'de saklanır.Kullanım konsantrasyonu Cip 10 μg/mL, BM-1 10 μg/mL ve BM-2 5μg/mL'dir.Kullanırken, önce kirlenmiş kültür ortamını aspire edin, BM-1 içeren RPMI1640 kültür ortamını ekleyin, ardından kültür ortamını 3 gün sonra aspire edin, BM-2 içeren RPMI1640 kültür ortamını ekleyin ve 4 gün boyunca kültür ekleyin ve bu şekilde art arda 3 gün boyunca devam edin. .33258 floresan boyama mikroskobu ile mikoplazmanın elimine edildiği kanıtlanıncaya kadar turlar yapılır, ardından 3-4 kez kültür ve pasaj için normal kültür ortamı eklenir.

2. Isıtma işlemi

Kirlenmiş doku kültürünün 41°C'de 18 saat süreyle inkübe edilmesi mikoplazmayı öldürebilir ancak hücreler üzerinde olumsuz etkileri vardır.Bu nedenle mikoplazmayı maksimum düzeyde öldürebilecek ve hücreler üzerinde en az etkiye sahip olabilecek ısıtma süresini araştırmak için tedaviden önce bir ön test yapılmalıdır.Bu yöntem bazen güvenilmezdir.Önce ilaçla tedavi edilip ardından 41°C'ye ısıtılırsa etkisi daha iyi olacaktır.

3. Mikoplazmaya özgü serum kullanın

Mikoplazma kontaminasyonu %5 tavşan mikoplazma immün serumu (hemaglutinasyon titresi 1:320 veya üzeri) ile giderilebilir.Spesifik antikor mikoplazmanın büyümesini engelleyebildiği için antiserum tedavisinden 11 gün sonra negatife döner ve 5 ay sonra negatif kalır.olumsuzdur.Ancak bu yöntem daha zahmetlidir ve antibiyotik kullanmak kadar kullanışlı ve ekonomik değildir.

4. Diğer yöntemler

Yukarıda belirtilen kontaminasyonun giderilmesi yöntemlerine ek olarak, hayvanlarda aşılama ve sterilizasyon yöntemleri, makrofaj fagositoz yöntemleri, kontamine olmuşlara bromourasil ekleme yöntemleri de vardır.kültür şişelerive sonra onları ışıkla, filtreleme vb. yöntemlerle ışınlamak, ancak bunların hepsi daha zahmetli ve etkisizdir.Bu nedenle, mikoplazma kontaminasyonu meydana geldiğinde, özellikle önemli bir değere sahip olmadığı sürece, genellikle atılır ve yeniden kültürlenir.

lütfen Whatsapp ve Wechat ile iletişime geçin: +86 180 8048 1709